基本信息

中文名稱: 脫硫生物素-三聚乙二醇-炔基

英文名稱: Desthiobiotin-PEG3-Alkyne

英文同義詞: Desthiobiotin-PEG3-Alk

分子式：C19H33N3O5

分子量：383.49

存儲溫度：-20℃

純度：95%

結構式：

核心功能與應用

1. 生物分子標記與檢測

• 通過炔基與疊氮修飾的蛋白、核酸或抗體反應，實現目標分子的特異性標記。

• 脫硫生物素部分可進一步與鏈霉親和素結合，用于親和純化或熒光檢測（如結合熒光染料標記的鏈霉親和素）。

2. 可逆親和純化

• 標記后的復合物可通過游離生物素競爭洗脫，避免傳統生物素-鏈霉親和素系統所需的強變性條件（如高溫或高鹽），從而保護樣品活性。

• 適用于動態研究（如細胞表面受體內吞）或脆弱蛋白的分離。

3. 活細胞成像與動態追蹤

• SPAAC反應無需金屬催化劑，毒性低，適合活細胞內代謝標記或實時追蹤分子動態。

• 例如，標記細胞表面糖蛋白以研究其內吞途徑。

4. 蛋白質組學與藥物開發

• 在蛋白質相互作用分析中，通過可逆標記減少非特異性結合，提高數據準確性。

• 用于靶向藥物遞送系統的開發，如生物素化納米顆粒的定向修飾。

實驗操作要點

1. 溶解與儲存

• 通常溶于DMSO或水（需超聲助溶），建議分裝后于-20℃避光保存，避免反復凍融導致降解。

• 工作濃度一般為1–10 mM（DMSO儲備液），需根據實驗體系優化。

2. 點擊化學反應條件

• CuAAC反應：需添加銅催化劑（如CuSO?）、還原劑（如抗壞血酸鈉）及配體（如TBTA）以提高效率，但可能對細胞有毒。

• SPAAC反應：無需金屬催化劑，使用DBCO-疊氮化物更溫和，適合活細胞標記。

3. 洗脫與檢測

• 親和純化時，用含游離生物素（如1–5 mM）的緩沖液競爭洗脫，避免使用SDS或高溫。

• 檢測可通過熒光、質譜或Western blot實現，需根據標記物類型選擇合適方法。

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